標本に関すること

Database for Aquatic-vertebrate Science

二重染色透明標本作成方法 使用する薬品：ホルマリン、軟骨染色液、トリプシン混合液、硬骨染色液、0.5%水酸化カリウム水溶液、グリセリン、チモール。 軟骨染色液：95％エタノール85ml、氷酢酸20ml、アルシャンブルー8GX10mgを混ぜて作ります。 トリプシン混合液：飽和ホウ砂水溶液3、水7の割合の液2リットルにトリプシンを小型薬サジに７杯程度入れます。 硬骨染色液：0.5%水酸化カリウム水溶液に少量のアリザリンレッドS粉末を溶かした液（濃紫色を呈する）。

	キイロサンゴハゼの二重染色透明標本 キイロサンゴハゼの尾鰭骨格：青い部分は軟骨		標本をホルマリンで固定します。液浸標本の固定参照。
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			固定した標本を水洗します（1-2日）。大型標本の場合には内臓を取り除き、3-4日水洗します。
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			水洗を終えた標本を軟骨染色液に入れます。
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			95％エタノール液に2-3時間標本を入れます。液を新しくして、再度2-3時間入れます。
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			75％エタノール液に2-3時間標本を入れます。
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			40％エタノール液に2-3時間標本を入れます。
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			15％エタノール液に2-3時間標本を入れます。
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			純水に移し、1日おきます。
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			トリプシン混合液に入れます。液の量は標本の体積の10-40倍。夏は室温でよいが、冬は30-35度程度の恒温槽に入れるとトリプシン活性が高くなります。
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			硬骨染色液に入れます。1-2日入れておきます。
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			0.5％水酸化カリウム水溶液に半日から1日入れて、余分な染色液を除きます。
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			0.5％水酸化カリウムとグリセリンの混合液に標本を移します。最初は水酸化カリウム８、グリセリン２の比率の溶液に入れ、７：３、６：４、５：５、４：６、３：７、２：８とグリセリンの比率を上げてゆき、最後に純粋のグリセリンに入れ、微量のチモール粉末（防腐剤）を加えます。それぞれの段階に1-2日ずつ入れます。
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			完成した標本はスチロールケースなどに保存します。

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